Cre鼠项目服务
随着研究的不断深入,,,,现代神经科学需要关注大量不同种类的神经元或胶质细胞,,,进行精细研究,,,除了特异性启动子的应用外,,,还可以借助多种Cre小鼠模型配合DIO病毒策略或flox小鼠策略以实现特异性操作神经元的目的。。。
Cre-LoxP系统
来源于噬菌体P1的Cre/loxP系统主要包括2个重要组成部分:一个是loxP位点,,另一个就是可以对loxP位点进行识别的Cre酶,,,使两个loxP位点间发生基因重组,,,实现对目的基因删除、、翻转、、、、易位和序列互换。。在神经科学领域,,,此技术可以用于对神经环路的特异性标记、、、、特异细胞类型中内源基因的功能研究及构建小鼠模型等。。。
Cre鼠策略
利用基因敲入手段,,借助CRISPR/Cas9技术,,,,将Cre重组酶定点插入到小鼠基因组中,,获得可特异性在某类神经元中表达Cre的工具鼠,,从而可以配合AAV-DIO病毒载体,,,,做到精准操控神经元的目的,,亦可以和多种Flox鼠搭配使用,,,研究不同基因的功能。。。。
以Thy1-iCre工具鼠为例构建策略
智迪保Cre鼠项目
Cre鼠配合重组AAV病毒可在特定脑区实现细胞特异性标记、、、、光遗传学和化学遗传学操纵、、在体钙成像记录,,,或者组织特异性的基因编辑。。
病毒载体介导的Cre/loxP系统
相较于转基因小鼠,,借助病毒载体介导的Cre系统实现特异性操作神经元或基因的目的,,同时可以大大缩短实验的周期,,,另外,,,多种多样的病毒载体,,,,可以最大限度的满足各类实验的需求。。。各类病毒载体的特点如下:
借助Cre品系的小鼠和Cre依赖表达的病毒载体结合使用,,,,可以达到特异性对某些细胞的标记和操控目的。。运用神经示踪技术对大脑特定神经环路的结构和功能进行解析时,,,,亦可以借助Cre重组酶系统和AAV血清型(比如rAAV2/9、、、rAAV2/retro、、、rAAV2/1)结合适用,,,达到特异性对神经环路标记和功能研究的目的。。
在实际进行实验课题过程中,,,,病毒载体辅助和Cre小鼠的配合使用即有互补性,,又能相互验证,,成为动物体内研究尤其是神经科学领域研究中不可或缺的助力。。